乐业至百色高速公路由主线和连接线组成，其中主线起于峨坝附近的红水河黔桂两省(区)交界处，与贵州省规划的惠水至罗甸高速公路终点相接，并与贵州共同建设红水河特大桥。路线向南跨越红水河，经百塘、下老、逻西、马庄、乐业县城东、皈里、那槐、央里、凌云县城、伶站，在那暮附近与隆林至百色高速公路相接，而后与隆百高速公路共线至永乐附近，继而向西南上跨既有南昆铁路、在建的云桂铁路，经东蚕，终于上宋附近，与百色至罗村口高速公路相接。路线全长约170公里，其中利用隆百高速公路长约16公里，实际修建里程154公里。